肥达反应(Widaltest)/p>
用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原,检测受检血清中有无相应抗体的半定量凝集试验,称肥达反应(Widaltest)。本试验与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下,能辅助诊断伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起的肠热症。
外斐反应(Wiel-Felix)/p>
斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原(OXk、OX19、OX2抗原)具有共同的耐热性多糖类属抗原,常用后者代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集试验称为外斐反应,用于立克次体病的辅助诊断。
传统的肥达、外斐试验采用试管法,存在试剂用量大、结果不易观察等缺点,现介绍一种较实用的平板法,试剂用量仅为试管法1/2、结果易判定等优点。
材料:华南生物工程有限公司生产的肥达氏试剂、外斐氏试剂。
试验的第一步(准备):
准备一块U型反应板,长18厘米,宽9厘米,每孔容积1毫升,并在上面做出清晰标识。
试验第二步(加样):
为方便说明加样步骤,先看反应板示意图:
第五排○○○○○○○○
第四排○○○○○○○○
第三排○○○○○○○○
第二排○○○○○○○○
第一排○○○○○○○○
(从底部算起)
OH甲乙丙OXkOX19OX2
操作步骤
试验第三步:混匀
用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅出的强度(转/分)混合3分钟。
试验第四步:恒温
放37℃度水浴箱恒温24小时,放水浴箱时请用纸板或其它物品做必要遮挡,此步不可省略,否则,请看下图:
这是遮盖纸板收集到的水滴。若这些水滴至反应板内,看结果时就真是葫芦僧乱判葫芦案了。做任何试验,细节真的很重要。
结果判定:
肥达反应临床意义:
1、一般O10,H1:,甲、乙、丙10才有临床意义,或在疾病早期及中后期分别采集两次血清,若第二份血清比第一份的效价高4倍以上增高具有诊断价值。
2、O及甲、乙其中之一项或丙凝集效价增高时,可以诊断副伤寒甲、乙、丙的某一种。
3、O抗原产生的抗体为lgM,出现较早,存在于血清的时间较短,与相应的抗血清反应时呈颗粒状凝集;H抗体为lgG,出现较迟,持续存在的时间较长,与相应的抗血清呈絮状反应。
4、O高H不高:
a.疾病早期;
b.沙门菌属中其它菌种感染引起的交叉反应;
c.H→O变异的沙门菌引起的感染。
建议一周后复查,如一周后H也有升高,可证实为肠热症。
5、H高O不高:
a.可能为疾病的晚期;
b.以往患过伤寒、副伤寒或接受过预防接种;
c.回忆反应等。
如在使用过程中遇到问题,请与广州华南生物工程有限公司技术人员联系。
外斐反应临床意义:
1、血清抗体效价达1:以上有意义。病程中双份或多份血清试验,若效价有4倍以上增高具有诊断意